El sistema de secreción tipo VI (T6SS) es un complejo multiproteico ampliamente distribuido en bacterias Gram-negativas, implicado en procesos como la competencia bacteriana, la adaptación ambiental y la interacción con otros organismos. En Mesorhizobium sp. Ljnodule218, el T6SS se organiza en un clúster génico que incluye los genes tssA y tssH, separados por una región intergénica con posible función reguladora. El objetivo de este trabajo fue estudiar la actividad promotora de esta región, denominada PtssA, mediante aproximaciones experimentales e in silico.
La actividad transcripcional de PtssA se analizó utilizando un sistema reportero GUS, evaluando su expresión en distintos medios de cultivo, así como bajo diferentes condiciones de pH y temperatura. Los resultados mostraron que la actividad del promotor depende significativamente del medio de cultivo, observándose una mayor expresión en medio YMB, lo que sugiere una regulación asociada al estado nutricional de la célula. En este medio, la actividad del promotor se vio modulada por el pH, siendo mayor en condiciones neutras o ligeramente alcalinas, y disminuyendo en condiciones ácidas. Asimismo, la temperatura influyó en la expresión, con una mayor actividad a la temperatura óptima de crecimiento de la bacteria, 28 ºC.
ABSTRACT
The type VI secretion system (T6SS) is a multiprotein complex widely distributed in Gram-negative bacteria, involved in processes such as bacterial competition, environmental adaptation, and interaction with other organisms. In Mesorhizobium sp. Ljnodule218, the T6SS is organized into a gene cluster that includes the tssA and tssH genes, separated by an intergenic region with a possible regulatory function. The aim of this work was to study the promoter activity of this region, called PtssA, using experimental and in silico approaches.
The transcriptional activity of PtssA was analyzed using a GUS reporter system, evaluating its expression in different culture media, as well as under different pH and temperature conditions. The results showed that promoter activity depends significantly on the culture medium, with higher expression observed in YMB medium, suggesting regulation associated with the nutritional status of the cell. In this medium, promoter activity was modulated by pH, being higher under neutral or slightly alkaline conditions and decreasing under acidic conditions. Temperature also influenced expression, with greater activity at the optimal bacterial growth temperature, 28 ºC.
El sistema de secreción tipo VI (T6SS) es un complejo multiproteico ampliamente distribuido en bacterias Gram-negativas, implicado en procesos como la competencia bacteriana, la adaptación ambiental y la interacción con otros organismos. En Mesorhizobium sp. Ljnodule218, el T6SS se organiza en un clúster génico que incluye los genes tssA y tssH, separados por una región intergénica con posible función reguladora. El objetivo de este trabajo fue estudiar la actividad promotora de esta región, denominada PtssA, mediante aproximaciones experimentales e in silico.
La actividad transcripcional de PtssA se analizó utilizando un sistema reportero GUS, evaluando su expresión en distintos medios de cultivo, así como bajo diferentes condiciones de pH y temperatura. Los resultados mostraron que la actividad del promotor depende significativamente del medio de cultivo, observándose una mayor expresión en medio YMB, lo que sugiere una regulación asociada al estado nutricional de la célula. En este medio, la actividad del promotor se vio modulada por el pH, siendo mayor en condiciones neutras o ligeramente alcalinas, y disminuyendo en condiciones ácidas. Asimismo, la temperatura influyó en la expresión, con una mayor actividad a la temperatura óptima de crecimiento de la bacteria, 28 ºC.
ABSTRACT
The type VI secretion system (T6SS) is a multiprotein complex widely distributed in Gram-negative bacteria, involved in processes such as bacterial competition, environmental adaptation, and interaction with other organisms. In Mesorhizobium sp. Ljnodule218, the T6SS is organized into a gene cluster that includes the tssA and tssH genes, separated by an intergenic region with a possible regulatory function. The aim of this work was to study the promoter activity of this region, called PtssA, using experimental and in silico approaches.
The transcriptional activity of PtssA was analyzed using a GUS reporter system, evaluating its expression in different culture media, as well as under different pH and temperature conditions. The results showed that promoter activity depends significantly on the culture medium, with higher expression observed in YMB medium, suggesting regulation associated with the nutritional status of the cell. In this medium, promoter activity was modulated by pH, being higher under neutral or slightly alkaline conditions and decreasing under acidic conditions. Temperature also influenced expression, with greater activity at the optimal bacterial growth temperature, 28 ºC. Read More
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